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    體外受精實驗

    簡要描述:動物體外受精實驗(IVF) 指在人工模擬的體內(nèi)環(huán)境中,使哺乳動物的精子和卵子完成受精過程的技術(shù)。受精后形成的胚胎可移植至受體子宮發(fā)育,所得后代稱“試管動物"(test-tube animal)。

    • 更新時間:2025-07-17
    • 瀏覽次數(shù):37

    詳細介紹

    一、定義與技術(shù)原理

    動物體外受精(IVF) 指在人工模擬的體內(nèi)環(huán)境中,使哺乳動物的精子和卵子完成受精過程的技術(shù)。受精后形成的胚胎可移植至受體子宮發(fā)育,所得后代稱“試管動物"(test-tube animal)。
    核心生物學原理

    1. 精子獲能(Capacitation)

      • 精子需去除表面“去能因子"(如糖蛋白),通過添加肝素、鈣離子或血清白蛋白誘導獲能,增強運動能力與穿透卵子能力。

      • 獲能過程依賴物種特異性條件(小鼠需30分鐘,豬需2–3小時)。

    2. 卵母細胞成熟(Oocyte Maturation)

      • 體內(nèi)成熟卵子可直接使用;未成熟卵子需體外培養(yǎng)至MII期(第二次減數(shù)分裂中期)。

    3. 受精兼容性:人工環(huán)境需模擬輸卵管生理條件(溫度、pH、滲透壓、營養(yǎng))以支持精卵結(jié)合。


    二、標準化操作流程

    1. 卵母細胞采集與處理

    方法適用場景操作要點
    超數(shù)排卵法實驗動物(小鼠、大鼠)注射FSH/LH激素誘導多排卵,從輸卵管采集成熟卵子
    活體卵巢穿刺法小牲畜(牛、羊)臨床操作超聲或腹qiang鏡引導采集活體卵巢卵子
    宰殺后卵巢采集法屠宰場資源利用取新鮮卵巢分離未成熟卵子,體外培養(yǎng)成熟

    2. 精子采集與獲能

    • 采集:附睪穿刺或精液收集。

    • 獲能處理

      • 化學法:添加肝素(牛)、鈣離子載體(小鼠)。

      • 生物法:與含卵丘細胞的卵泡液共培養(yǎng)。

    3. 體外受精

    技術(shù)原理應用場景
    共培養(yǎng)法精卵在培養(yǎng)液中自然結(jié)合常規(guī)IVF(牛、小鼠)
    顯微注射法(ICSI)直接注入單個精子至卵胞質(zhì)低活力精子或基因編輯動物

    4. 胚胎培養(yǎng)與評估

    • 培養(yǎng)基:KSOM+AA(小鼠)、SOF(牛)、TALP系列(跨物種)。

    • 發(fā)育監(jiān)測:形態(tài)學分級。

    5. 胚胎移植或冷凍

    • 移植:同步受體發(fā)情周期,手術(shù)/非手術(shù)法植入子宮。

    • 冷凍保存:液氮(-196℃)長期儲存遺傳資源。


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